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淀粉的含量測定-酸水解法


  酸水解法
  一、原理:
  樣品經除去脂肪及可溶性糖類后,其中淀粉用酸水解成具有還原性的單糖,然后按還原糖測定,并折算成淀粉。
  二、試劑:
  1、乙醚;
  2、85%乙醇溶液;
  3、6N鹽酸溶液;
  4、40%氫氧化鈉溶液;
  5、10%氫氧化鈉溶液;
  6、甲基紅指示液:0.2%乙醇溶液
  7、精密PH試紙
  8、20%乙酸鉛溶液
  9、10%硫酸鈉溶液
  10、乙醚
  11、堿性酒石酸銅甲液。(配制見前)
  12、堿性酒石酸銅乙液;(配制見前)
  13、硫酸鐵;(配制見前)
  14、0.1000N高錳酸鉀標液
  三、儀器:
  1、水浴鍋
  2、高速組織搗碎機:1200r/min
  3、皂化裝置并附250毫升錐形瓶。
  四、操作方法:
  1、樣品處理
  A、糧食,豆類、糕點、餅干等較干燥的樣品,稱取2.0-5.0克磨碎過40目篩的樣品,置于放有慢速濾紙的漏斗中,用30毫升乙醚分三次洗去樣品中的脂肪,棄去乙醚。再用150毫升85%乙醇溶液分數次洗滌殘渣,除去可溶性糖類物質。并濾干乙醇溶液,以100毫升水洗滌漏斗中殘渣并轉移至250毫升錐形瓶中,加入30毫升6N鹽酸,接好冷凝管,置沸水浴中回流2小時。回流完畢后,立即置流水中冷卻。待樣品水解液冷卻后,加入2滴甲基紅指示液,先以40%氫氧化鈉溶液調至黃色,再以6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深,可用精密PH試紙測試,使樣品水解液的PH約為7。然后加20毫升20%乙酸鉛溶液,搖勻,放置10分鐘。再加20毫升10%硫酸鈉溶液,以除去過多的鉛。搖勻后將全部溶液及殘渣轉入500毫升容量瓶中,用水洗滌錐形瓶,洗液合并于容量瓶中,加水稀釋至刻度。過濾,棄去初濾液20毫升,濾液供測定用。
  B、蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食制品:按1:1加水在組織搗碎機中搗成勻漿(蔬菜、水果需先洗凈、晾干、取可食部分)稱取5-10克勻漿(液體樣品可直接量取),于250毫升錐形瓶中,加30毫升乙醚振搖提取(除去樣品中脂肪),用濾紙過濾除去乙醚,再用30毫升乙醚淋洗兩次,棄去乙醚。以下按A自“再用150毫升85%乙醇溶液”起依法操作。
  2、測定:
  吸取50毫升處理后的樣品溶液,于400毫升燒杯內,加25毫升堿性酒石酸銅甲液及25毫升乙液。于燒杯上蓋一表面皿加熱,控制在4分鐘沸騰再準確煮沸2分鐘,趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或G4垂融坩堝抽濾,并用60℃熱水洗滌燒杯及沉淀,至洗液不呈堿性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中,加25毫升硫酸鐵溶液及25毫升水,用玻棒攪拌使氧化銅完全溶解,以0.1000N高錳酸鉀標液滴定至微紅色為終點。
  同時吸取50毫升水,加與測樣品時相同量的堿性酒石酸銅甲乙液、硫
  酸鐵溶液及水,按同一方法做試劑空白試驗。
  計算:x2=((A3-A4)×0.9)/(M2×V2/500×100)------------------------×100
  式中:
  X2:樣品中淀粉含量,%;
  A3:測定用樣品中水解液中還原糖含量,mg;
  A4:試劑空白中還原糖的含量,mg;
  m2:樣品質量,mg;
  V2:測定用樣品水解液體積,m1;
  500:樣品液總體積,ml;,
  0.9:還原糖折算成淀粉的換算系數。
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